产共自上世紀50年代開始-全球財經全球通

产共自上世紀50年代開始

时间：2025-05-05 05:33:17来源：

天然的产共CLA主要存在於動物、植物、轭亚海產品中，油酸如在牛、菌株酵性究羊等反芻類動物的选及乳脂和肉製品中含量較高。c9，质研t11-CLA還被命名為瘤胃酸（ru-menicacid）。产共自上世紀50年代開始，轭亚人們接連在反芻動物的油酸脂肪組織、烤牛肉中發現了CLA，菌株酵性究並證實其抗癌功能。选及發酵乳是质研經乳酸菌發酵動物乳而製成的，因獨特的产共滋味和特殊的營養價值而受到人們的喜愛。對發酵乳產品的轭亚檢測，包括感官評價、油酸理化指標、汙染物限量、真菌毒素限量、微生物限量、乳酸菌數等。對發酵乳發酵性能的檢測包括質構、流變、滋味、氣味、持水性等指標。

目前，在原始發酵乳基礎上加入其它營養物質，以提高發酵乳的營養特性、風味特性和發酵特性的產品越來越多。加入益生菌的發酵乳營養更加豐富，攝入的益生菌在人體內積累定植後，對改善宿主體內的微生態平衡具有重要作用，益生菌乳製品同時還具有緩解乳糖不耐症，抗高血壓，降低生殖道感染風險，促進Ca²⁺吸收和維生素生成等功能。許多可生產CLA的菌株均為乳酸菌，可用於發酵。當使用能生產CLA的菌株生產功能性乳製品時，便可將CLA較好地融入產品中，從而利於乳製品的多種有益功能。有研究發現，將產CLA的乳酸乳球菌、植物乳杆菌和幹酪乳杆菌複配後發酵牛奶，所得產物中CLA最大值為56.51mg/mL。目前大多CLA在食品中應用較少，如何能獲得高產CLA的乳酸菌並應用於發酵乳中，具有較大的意義。本研究從發酵乳中篩選菌株，得到產共軛亞油酸的菌株，將其直接用於製作發酵乳，研究該菌株的發酵性能，測定CLA的產量，評估發酵乳的綜合指標，以獲得CLA含量高，品質好的發酵乳。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

發酵乳樣品和純牛奶采自內蒙古呼和浩特和呼倫貝爾，采集後置於無菌容器，放於冰盒中帶回。革蘭氏染色液試劑盒，索萊寶科技有限公司（北京）；細菌DNA提取試劑盒，康為世紀生物科技有限公司（北京）；DL2000DNAMarker、DL15000DNAMarker，大連寶生物；2×EsTaqMasterMix（Dye）、6×SuperStainLoadingBuffer，北京康為世紀；溶菌酶，北京索萊寶；瓊脂糖，北京中科瑞泰生物；亞油酸（LA），90%純度，上海聯邁生物；共軛亞油酸標準品（CLA），Sigma公司。

1.2 儀器與設備

PCR儀（Eppendorf）、高速冷凍離心機（Ep-pendorf），德國Eppendorf公司；超微量核酸蛋白定量儀（ThermoFisher），ThermoFisher公司；質構儀（BROOKFIELD），美國BROOKFIELD；電子舌（In-sent），日本Insent。

1.3 試驗方法

1.3.1 傳統發酵乳中乳酸菌的分離純化

發酵乳梯度稀釋後塗布MRS平板，37℃培養2d。挑取菌落狀態不同的透明和半透明單菌落，每個單菌落經過3～4次劃線純化後，37℃，靜置培養24～48h，保存備用。

1.3.2 革蘭氏染色鑒定

挑取待檢菌落於載玻片，滴入生理鹽水稀釋，固定後進行染色，具體操作見革蘭氏染色液試劑盒說明書，染色後於顯微鏡下觀察菌體形態。

1.3.3 CLA含量測定

選取CLA質量濃度為0.0，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0μg/mL的樣品，測定吸光度值（λ=233nm），製作標準曲線。選取革蘭氏染色陽性菌株接種MRS培養基（0.5mg/mLLA），37℃培養24～48h，加入正己烷充分振蕩，4℃，10000g離心10min，取上清液測定吸光度值（λ=233nm），根據標準曲線計算生成CLA的含量。

1.3.4 16srDNA鑒定菌種

利用細菌基因組DNA提取試劑盒提取已篩選的乳酸菌基因組，稀釋基因組DNA至終質量濃度為20ng/μL，以此為模板，用16s通用引物進行PCR擴增，PCR驗證結果呈陽性的菌株送交上海派森諾生物科技股份有限公司測序。

1.3.5 單因素試驗

以發酵乳的質構特性、滋味特性和CLA產量作為考察指標，研究植物乳杆菌HAC01接種量、發酵溫度、發酵時間、發酵pH值、LA添加量，發酵結束後後熟時間對發酵性質的影響。利用質構儀測定硬度、稠度、黏度、黏聚性等指標，測定條件及參數為：探針選擇直徑為2.5cm的平底圓柱形探針，測定模式選擇阻力測試，感應力選擇自動感應10g，測定前下降速度1.0mm/s，測定速率2.0mm/s，測定後速度8mm/s，進入樣品深度20mm，對測試樣品進行兩次壓縮，間隔時間5s。利用電子舌測定樣品的綜合味覺信息，指標包括酸、甜、苦、鹹、鮮。